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ABI PCR仪的操作注意事项
点击次数:136 发布时间:2020-02-24
  ABI PCR仪利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前,常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将ABI PCR仪分为普通ABI PCR仪,梯度ABI PCR仪,原位ABI PCR仪,实时荧光定量ABI PCR仪四类。
  尽管扩增序列的残留污染大部分是假阳性反应的原因,样品间的交叉污染也是原因之一。因此,不仅要在进行扩增反应是谨慎认真,在样品的收集、抽提和扩增的所有环节都应该注意:
  1、操作多份样品时,制备反应混合液,先将dNTP、缓冲液、引物和酶混合好,然后分装,这样即可以减少操作,避免污染,又可以增加反应的精确度;
  2、戴一次性手套,若不小心溅上反应液,立即更换手套;
  3、避免反应液飞溅,打开反应管时为避免此种情况,开盖前稍离心收集液体于管底。若不小心溅到手套或桌面上,应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面;
  4、加入反应模板,加入后盖紧反应管;
  5、使用一次性吸头,严禁与PCR产物分析室的吸头混用,吸头不要长时间暴露于空气中,避免气溶胶的污染;
  6、操作时设立阴阳性对照和空白对照,即可验证PCR反应的可靠性,又可以协助判断扩增系统的可信性;
  7、尽可能用可替换或可高压处理的加样器,由于加样器较容易受产物气溶胶或标本DNA的污染,建议使用可替换或高压处理的加样器。
  8、重复实验,验证结果,慎下结论。
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